色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此負(fù)擔(dān)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。

 

下面對(duì)液相色譜柱的四個(gè)物理性質(zhì)參數(shù)進(jìn)行說明。

 

1、柱長，內(nèi)徑

 

如250*4.6mm。一般柱長在2—250mm，柱越長，分離度越高，但柱壓更高，分離所需時(shí)間更長;但分離度與理論塔板數(shù)的平方根成正比，所以一昧增加柱長并不是*的分離手段，一般情況下，150mm、5um的填料可以提供足夠的塔板數(shù)。

 

2、粒徑

 

粒徑影響色譜分離度。粒徑越小，分離越快，柱效越高，但柱壓力越高，柱容易被污染，導(dǎo)致柱壽命降低。常見分析柱通常使用5um填料，復(fù)雜的多組分樣品分離一般使用3.5um粒徑，更大內(nèi)徑的制備色譜柱通常使用更大的粒徑。如果固定相選擇是正確，但是分離度不夠，那么選用更小的粒度的填料是很有用的。3.5um填料填充柱的柱效比相同條件下的5um填料的柱效提高近30%;然而，3.5um的色譜柱的背壓卻是5um的2倍，因此如何選擇填料粒徑需要根據(jù)現(xiàn)實(shí)情況而定。

 

3、孔徑　

 

孔徑，60A，120A，300A等。孔徑小，則含孔率高，比表面積大，載碳量高;色譜柱填料孔徑大小需和分子大小相匹配，保證分子自由進(jìn)出填料孔并與孔內(nèi)表面的鍵合相進(jìn)行分離分配，通常要求孔徑直徑是分子直徑的3倍以上，一般小分子使用80—120A，大分子使用300A。

 

4、顆粒形狀

 

顆粒形狀，一般有球形和不規(guī)則形，當(dāng)使用黏度較大的流動(dòng)相時(shí)，球形顆粒可以降低柱壓，延長色譜柱壽命。

 

5、比表面積

 

比表面積，指的是每克填料的表面積，如180m2/g—350m2/g，與粒度和含孔率有關(guān);比表面積大，會(huì)增加樣品與鍵合相之間的反應(yīng)，增加保留和分離度;比表面積小則可以縮短分析時(shí)間和平衡時(shí)間，并不是比表面積大或者小就更好，需要選擇合適的比表面積。